文章标题:梨小食心虫几丁质合成酶2基因的 克隆与表达研究
文章作者:杨 静1** 庾 琴1** 高 越1 刘中芳1 史高川2 张鹏九1 范仁俊1**
关 键 词: 梨小食心虫,几丁质合成酶,表达谱,荧光定量PCR
文章摘要:
【目的】 研究梨小食心虫Grapholitha molesta (Busck)几丁质合成酶2(GmCHS2)基因序列和表达特性,为进一步研究其功能及新型杀虫剂的开发提供理论依据。【方法】 利用转录组数据和RACE技术首次获得GmCHS2基因cDNA序列(命名为GmCHS2,GenBank登录号为KY242360),利用其他昆虫同源序列构建系统发育树,利用实时荧光定量PCR技术研究GmCHS2在不同发育阶段和不同组织的表达特性。【结果】 GmCHS2基因序列全长4 991 bp,开放阅读框为4 554 bp,其中5¢端非编码区长267 bp,3¢端非编码区长170 bp,共编码1 517个氨基酸,包含了14个跨膜螺旋。系统发育树结果表明该基因属于几丁质合成酶2类基因。GmCHS2基因在试虫不同发育阶段都有表达,预蛹期和成虫期表达量最高;不同组织中,前肠和中肠的表达量最高,其次是后肠,其余组织表达量很少或不表达。【结论】 本文研究了GmCHS2基因在梨小食心虫不同发育阶段和组织部位的表达特性,该基因可能在梨小食心虫生长发育过程中具有重要作用。