《应用昆虫学报》

文章标题:中华蜜蜂PP2A基因的时空表达谱及蛋白分子特征

文章作者:康 婧1** 陈 颖1** 孙恺玥1 王勇杰1 臧 贺1, 2, 3 冯睿蓉4 付中民1 陈大福1, 2, 3 邱剑丰1, 2, 3*** 郭 睿1, 2, 3***
关 键 词:中华蜜蜂;蛋白磷酸酶2A;时空表达谱;蛋白分子特征
文章摘要:【目的】 本研究旨在通过测定中华蜜蜂Apis cerana cerana蛋白磷酸酶2A(Protein phosphatase 2A , PP2A)基因AcPP2A的时空表达谱和解析AcPP2A蛋白的理化性质和分子特征,为进一步研究PP2A在中华蜜蜂生长发育中的功能提供参考和基础。方法】 通过RT-qPCR检测AcPP2A在中华蜜蜂工蜂的触角、中肠、脑、毒腺、表皮、咽下腺和脂肪体等组织,卵、幼虫、预蛹和蛹及不同日龄工蜂成虫中的相对表达量。使用NCBI网站上的ORF工具,Expasy网站上的Protparam、ProtScale和SWISS-model软件,SignalP 4.1 Server、NetPhos 3.1 Server、TMHMM和SOPMA等软件预测AcPP2A蛋白的分子特征和理化性质,鉴定中华蜜蜂和其他物种PP2A的保守基序和结构域,并构建系统进化树。结果】 AcPP2A含有5 174个核苷酸,可编码475个氨基酸;AcPP2A的蛋白分子量约为54.78 kD,脂溶系数为78.80,等电点为5.97,分子式为C2411H3781N671O742S23,平均亲水系数为﹣0.521;AcPP2A不含跨膜结构域和信号肽。中华蜜蜂、无刺蜂Melipona quadrifasciata、西方蜜蜂Apis mellifera、美洲东北熊蜂Bombus impatiens、橡子蚂蚁Temnothorax curvispinosus、苜蓿切叶蜂Megachile rotundata、火红熊蜂Bombus pyrosoma、巴西无刺蜂Frieseomelitta varia、顶切叶蚁Acromyrmex echinatior、东南蓝莓蜂Habropoda laboriosa、鸭嘴海豆芽Lingula anatina的PP2A含有相同的6个保守基序(Motif1、Motif2、Motif3、Motif4、Motif5和Motif6)和1个相同的结构域(CDC55超家族)。中华蜜蜂与橡子蚂蚁的PP2A在进化树上聚为一支。【结论】 AcPP2A是潜在的酸性蛋白、亲水性蛋白和非跨膜胞内蛋白,具有较高的保守性;AcPP2A的表达存在组织及发育阶段的广泛性和差异性,在毒腺和卵发育中可能发挥重要功能。