文章标题：小地老虎AiJHAMT2基因的分子特征及其生物学功能分析

文章作者：贾书静1** 邢嘉琪1** 余佳敏1, 2 江连强3 邓 全3 马 鹏3 刘东阳3
关 键 词： 小地老虎；保幼激素酸甲基转移酶；序列分析；基因沉默；生长发育
文章摘要：

【目的】 鉴定小地老虎Agrotis ipsilon保幼激素酸甲基转移酶（Juvenile hormone acid O-methyltransferase）AiJHAMT2基因，解析其序列特征，并明确其生物学功能。【方法】 利用同源检索技术从小地老虎转录组中鉴定AiJHAMT2的cDNA序列，使用生物信息学软件分析其序列特征，通过RNA干扰技术沉默AiJHAMT2，分析小地老虎幼虫保幼激素滴度、存活率、体长、体重、化蛹率和羽化率的变化。【结果】 AiJHAMT2的开放阅读框为855 bp，其编码的蛋白质具有昆虫JHAMT的典型特征，包括S-腺苷甲硫氨酸结合域以及11个能够与底物发生互作的氨基酸残基。AiJHAMT2基因位于小地老虎12号染色体，在基因组上的长度为5 673 bp，包含4个外显子和3个内含子。系统进化分析结果表明AiJHAMT2与东方粘虫Mythimna separata MsJHAMT2进化关系最近。向小地老虎3龄幼虫注射靶向AiJHAMT2的双链RNA能够有效沉默该基因，注射后24和48 h时，AiJHAMT2表达水平与对照组相比分别显著下降了74.0%（P=0.026）和76.6%（P=0.008），而AiJHAMT1表达水平在注射后48 h时显著上升至对照组的2.21倍（P=0.009）。沉默AiJHAMT2后，幼虫保幼激素滴度显著下降了46.4%（P=0.020），幼虫存活率、体长、体重和化蛹率分别显著降低了28.1%（P<0.001）、31.7%（P=0.007）、36.3%（P=0.002）和35.2%（P<0.001），但沉默AiJHAMT2未对小地老虎羽化率产生显著影响（P=0.252）。【结论】 沉默AiJHAMT2显著降低小地老虎幼虫存活率并阻碍其生长和化蛹，表明该基因具有作为RNA干扰靶标用于小地老虎防治的潜力。