文章标题:西方蜜蜂鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶1的分子特征及基因表达模式
文章作者:王芳吉1** 王 宁1** 李紫诺1 龚海宁1 姜 敏1 刘怡文1 付中民1, 2, 3 郭 睿1, 2, 3 陈大福1, 2, 3 邱剑丰1, 2, 3***
关 键 词:西方蜜蜂;鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶1;时空表达;生物信息学;分子特征
文章摘要:
【目的】 旨在分析西方蜜蜂Apis mellifera鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶1(Sphingosine-1-phosphate phosphatase 1, AmSgpp1)基因的分子特征、保守基序、结构域和系统进化,并解析AmSgpp1的时空表达模式,为AmSGPP1的功能研究提供参考和基础。【方法】
通过PCR验证AmSgpp1的表达,相关软件分析AmSGPP1的分子特征、保守基序和系统进化等。RT-qPCR检测AmSgpp1在工蜂成虫中肠等7个组织中的相对表达量;进一步检测AmSgpp1在卵、3日龄(d)(幼虫)、5 d(幼虫)、7 d(预蛹)、9 d(预蛹)和11 d(蛹),以及工蜂成虫1、2、6、8、12 d中的相对表达量。【结果】 AmSgpp1在西方蜜蜂工蜂中真实表达,CDS含有1 302个核苷酸,编码433个氨基酸。AmSGPP1的分子质量约为49.53 kD,蛋白质脂溶系数为107.37,等电荷点为8.59,氨基酸平均亲水系数为0.321,可同时定位于质膜、细胞质和过氧化物酶体。AmSGPP1含有7个跨膜结构域,但不含信号肽。西方蜜蜂与其他8个物种的SGPP1蛋白均包含1个相同的PAP2_SPPase1结构域和10个相同的保守基序。AmSgpp1在西方蜜蜂工蜂成虫的7个组织中差异表达,在脂肪体和中肠组织的表达量最高,毒腺次之。AmSgpp1在西方蜜蜂的卵、幼虫期和蛹期差异表达,在卵中的表达量最高,9 d(预蛹)最低,其表达量随发育时间逐渐降低;AmSgpp1在工蜂1、2、6、8和12 d成虫体内差异表达,在12
d成虫中表达量最高,且显著高于其它时期(P < 0.05)。【结论】 AmSGPP1是疏水性的胞内跨膜蛋白;西方蜜蜂与其他物种的SGPP1具有较高的基序和结构域的保守性,以及氨基酸的同源性;AmSgpp1在西方蜜蜂的不同组织和发育阶段中差异表达。