文章标题：番茄潜叶蛾CYP9A304v2基因的克隆、时空表达及对乙基多杀菌素的表达响应

文章作者：王圣宇1** 解津刚1** 颜国荣2 林明灏1 王鑫海1 王圣斐1 王建民1 李玉珊2 刘小宁1***
关 键 词：番茄潜叶蛾；CYP9A304v2；乙基多杀菌素；时空表达；生物信息学；分子对接
文章摘要：【目的】 世界性入侵害虫番茄潜叶蛾Tuta absoluta对生物杀虫剂乙基多杀菌素表现出逐渐增强的抗药性，本研究旨在探究CYP9亚家族基因CYP9A304v2在番茄潜叶蛾生长发育及代谢乙基多杀菌素过程中的潜在功能。【方法】 本研究通过基因克隆、生物信息学分析、时空表达谱检测、胁迫诱导实验及分子对接等技术，对CYP9A304v2基因的序列特征、系统发育关系、在不同发育阶段以及乙基多杀菌素胁迫条件下的表达模式、以及其蛋白与药剂的结合能力进行分析。【结果】 CYP9A304v2基因开放阅读框长度为1 596 bp，编码了531个氨基酸，系统发育分析揭示番茄潜叶蛾CYP9A304v2属于CYP6家族。时空表达谱显示该基因在番茄潜叶蛾幼虫4龄和蛹期特异性高表达，且在乙基多杀菌素胁迫下显著上调表达（P ＜ 0.05）。分子对接结果显示，CYP9A304v2蛋白与乙基多杀菌素具有较强的结合亲和力，结合自由能均低于﹣37.7 kJ/mol。【结论】 时空表达谱显示CYP9A304v2在番茄潜叶蛾幼虫4龄及蛹期特异性高表达，且其蛋白与乙基多杀菌素具有强结合亲和力，暗示该基因可能在幼虫-蛹转变期间及对乙基多杀菌素的解毒代谢起关键作用。本研究为番茄潜叶蛾抗药性机制研究提供了候选基因及理论依据。